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主營(yíng)：原位雜交,亞細(xì)胞定位,蛋白互作,啟動(dòng)子篩選
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原位雜交雜交液
（一）雜交液內(nèi)除含一定濃度的標(biāo)記探針外，還含有較高濃度的鹽類、甲酰胺、硫酸葡聚糖、牛白蛋白及載體DNA或RNA等。
（二）雜交液中含有較高濃度的Na+可使雜交率增加，可以減低探針與組織標(biāo)本之間的靜電結(jié)合。
（三）賈酰胺可使雜交溫度降低，所以雜交液中加入適量的甲酰胺，原位雜交，可避免因雜交溫度過高而引起的組織形態(tài)結(jié)構(gòu)的破壞以及標(biāo)本的脫落。
（四）硫酸葡聚糖能與水結(jié)合，從而減少雜交液的有效容積，提高探針有效濃度，以達(dá)到提高雜交率的目的。
原位雜交是一種生物學(xué)技術(shù)，它可以在細(xì)胞或組織中特定部位檢測(cè)DNA或RNA的存在，原位雜交公司，而不需要將DNA或RNA分離出來。這項(xiàng)技術(shù)使用標(biāo)記的DNA或RNA探針，與細(xì)胞或組織中的相應(yīng)DNA或RNA進(jìn)行特異性結(jié)合，然后通過光學(xué)顯微鏡或電子顯微鏡觀察探針的位置和數(shù)量。
原位雜交的原理很簡(jiǎn)單。DNA或RNA分子具有互補(bǔ)的核苷酸序列，因此可以通過氫鍵相互結(jié)合。將標(biāo)記的DNA或RNA探針與細(xì)胞中的DNA或RNA進(jìn)行雜交，GISH，可以特異性地檢測(cè)這些探針的位置和數(shù)量。探針的數(shù)量和位置可以反映DNA或RNA在細(xì)胞中的水平和分布。
原位雜交第二天
1.
1）將探針回收，放于－20C保存(通常探針可重復(fù)使用十次左右)。
2）加入50%甲酰胺/2XSSCT溶液1毫升，動(dòng)物組織原位雜交，60℃，放置30分鐘，重復(fù)一次。
3）置換2XSSCT1ml，60℃，放置15分鐘。
4）置換0.2XSSCT1ml，60℃，放置30分鐘，重復(fù)一次。
2.
1）用MABT洗兩次，每次五分鐘，放在搖床輕輕搖動(dòng)。
2）室溫下加1ml 1：2：7溶液，時(shí)間為一小時(shí)。
3）按1：3000的比例在1：2：7溶液中加入酶連，4C 冰箱過夜。
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第3年
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