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武漢貝科新肽科技有限公司
主營(yíng)：原位雜交,亞細(xì)胞定位,蛋白互作,啟動(dòng)子篩選
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將32 P標(biāo)記的雙鏈DNA探針于100℃加熱5分鐘，迅速置于冰浴中。單鏈探針不必變性。將探針加到雜交袋中雜交過(guò)夜。雜交期間，盛濾膜的容器應(yīng)蓋嚴(yán)，以防液體蒸發(fā)。
雜交結(jié)束后，去除雜交液，立即于室溫把濾膜放入大體積（300-500ml）的2×SSC和0.1% SDS溶液中，輕輕振搖5分鐘，并將濾膜至少翻轉(zhuǎn)一次。重復(fù)洗 一次，同時(shí)應(yīng)避免膜干涸。
68℃用300-500ml 1×SSC和0.1% SDS溶液洗膜兩次，每次1-1.5小時(shí)。此時(shí)已可進(jìn)行自顯影。如背景很高或?qū)嶒?yàn)要求嚴(yán)格的洗膜條件，熒光原位雜交技術(shù)，可用300-500ml 0.2×SSC和0.1% SDS的溶液于68℃將濾膜浸泡60分鐘。
原位雜交技術(shù)在其他生物領(lǐng)域也有廣泛的應(yīng)用，例如：
植物學(xué)研究：在植物學(xué)研究中，原位雜交技術(shù)可以用于檢測(cè)和定位特定基因的表達(dá)，研究基因組結(jié)構(gòu)和進(jìn)化。此外，還可以應(yīng)用于植物染色體組型分析、基因組印記研究等方面。
微生物學(xué)研究：在微生物學(xué)領(lǐng)域，原位雜交技術(shù)可以用于研究細(xì)菌、病毒等微生物的基因表達(dá)和定位，以及它們?cè)诃h(huán)境中的分布和相互作用。例如，通過(guò)標(biāo)記特異性探針，可以檢測(cè)腸道微生物群落中的特定，研究其在人體健康和疾病發(fā)生中的作用。
植物組織原位雜交的步驟包括以下幾個(gè)方面：
1. 制備組織樣品：從植物中取出需要研究的組織樣品，如根、莖、葉等。
2. 固定組織樣品：將組織樣品固定在載玻片上，通常使用或乙醇等化學(xué)物質(zhì)進(jìn)行固定。
3. 處理組織樣品：對(duì)固定的組織樣品進(jìn)行脫水、透明化、脫脂等處理，以便于DNA探針的穿透和結(jié)合。
4. 制備DNA探針：根據(jù)需要研究的基因序列，設(shè)計(jì)并合成DNA探針。DNA探針可以標(biāo)記熒光染料或性同位素，以便于檢測(cè)。
5. 雜交DNA探針：將DNA探針與組織樣品進(jìn)行雜交，通常需要在高溫下進(jìn)行，以便于DNA探針與RNA或DNA結(jié)合。
6. 檢測(cè)雜交信號(hào)：通過(guò)熒光顯微鏡或計(jì)數(shù)器等設(shè)備，檢測(cè)DNA探針與RNA或DNA的結(jié)合情況，確定目標(biāo)基因的表達(dá)模式和位置。
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第3年
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