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武漢貝科新肽科技有限公司
主營：原位雜交,亞細胞定位,蛋白互作,啟動子篩選
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亞細胞定位原理
利用GFP、RFP等熒光蛋白具有的熒光性質和靈敏性，來示蹤細胞內的蛋白。將目標蛋白與熒光蛋白的N端或者C端融合，通過瞬轉或穩轉，使該融合蛋白在受體材料細胞內表達，目標蛋白會牽引熒光蛋白一起定位到目標細胞器，經過激光共聚焦顯微鏡激光照射，熒光蛋白會發出熒光，蛋白互作，通過觀察熒光蛋白在細胞內顯示的位置，從而可以確定目標蛋白的亞細胞定位情況，即可對蛋白質進行準確定位。
細胞分餾和免疫印跡：先通過差速離心等方法將細胞勻漿分離成不同的亞細胞組分，如細胞核、線粒體、細胞質等。然后，利用免疫印跡技術，使用針對目標蛋白的特異性來檢測該蛋白在各個亞細胞組分中的存在情況，以此推斷其亞細胞定位。
電子顯微鏡技術：包括免疫電鏡技術等，可在超微結構水平上對細胞內的蛋白質等生物分子進行定位。通過將特異性與細胞內的目標蛋白結合，再用電子顯微鏡觀察標記物的位置，能夠地確定目標蛋白在細胞內的亞細胞定位。
直接法
將標記的特異性熒光，直接加在抗原標本上，經一定的溫度和時間的染色，用水洗去未參加反應的多余熒光，室溫下干燥后封片、鏡檢。
間接法
如檢查未知抗原，先用已知未標記的特異（）與抗原標本進行反應，用水洗去未反應的，再用標記的抗（第二）與抗原標本反應，使之形成—抗原—復合物，再用水洗去未反應的標記，干燥、封片后鏡檢。如果檢查未知，則表明抗原標本是已知的，待檢為，其它步驟的抗原檢查相同。
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第3年
