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武漢貝科新肽科技有限公司
主營：原位雜交,亞細胞定位,蛋白互作,啟動子篩選
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組織原位雜交(Tissue in situ hybridization），即原位雜交組織化學技術和原位雜交細胞化學技術
原位雜交技術的基本原理
利用核酸分子單鏈之間有互補的堿基順序，通過堿基對之間非共價鍵的形成，出現穩定的雙鏈區，形成雜交的雙鏈。
1.兩條核苷酸單鏈片段，在適宜的條件下，通過氫鍵結合，形成DNA-DNA、DNA一RNA或RNA一RNA雙鍵分子
2.應用帶有標記的（有性同位素，如3H、35S、32P，熒光素、生物素、等非性物質)DNA或RNA片段作為核酸探針，與組織切片或細胞內待測核酸(RNA或DNA）片段進行雜交
3.用自顯影等方法予以顯示，在光鏡或電鏡下觀察目的mRNA或DNA的存在與定位
用原位雜交術，可在原位研究細胞合成某種多肽或蛋白質的基因表達。
此方法有很高的敏感性和特異性，可進一步從分子水來探討細胞的功能表達及其調節機制。已成為當今細胞生物學、分子生物學研究的重要手段。
原位雜交技術還在以下生物領域有應用：
細胞化學和學：原位雜交技術可以用于研究細胞內特定化學物質的定位和分布，例如檢測細胞內酶、、神經遞質等物質的分布和定位。此外，還可以應用于學研究，熒光原位雜交，例如檢測細胞、分子的分布和定位等。
神經科學：在神經科學領域，原位雜交技術常被用于研究神經元的生長、發育和連接等過程。例如，通過標記特定基因的探針，可以檢測神經元中特定基因的表達和定位，進而研究其在神經信號傳遞、神經環路形成等方面的作用。
原位雜交第二天
1.
1）將探針回收，放于－20C保存(通常探針可重復使用十次左右)。
2）加入50%甲酰胺/2XSSCT溶液1毫升，60℃，放置30分鐘，重復一次。
3）置換2XSSCT1ml，60℃，放置15分鐘。
4）置換0.2XSSCT1ml，60℃，放置30分鐘，重復一次。
2.
1）用MABT洗兩次，每次五分鐘，放在搖床輕輕搖動。
2）室溫下加1ml 1：2：7溶液，時間為一小時。
3）按1：3000的比例在1：2：7溶液中加入酶連，4C 冰箱過夜。
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第3年
