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食品添加劑亮藍(lán)

帶金屬光澤的深紫至青銅色顆粒或粉末。無臭。耐光性及耐熱性強(qiáng)。對檸檬酸、酒石酸、堿穩(wěn)定。易溶于水（18.7g/100ml，21℃），0.05%中性水溶液呈清澈藍(lán)色。弱酸時呈青色，強(qiáng)酸時呈黃色，僅在煮沸并加堿時呈紫色。溶于乙醇（1.5g/100ml，95%乙醇溶液，21℃）。溶于甘油和丙二醇。與檸檬黃可配成綠色色素。

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考馬斯亮藍(lán)G-250法測定蛋白質(zhì)含量的原理是什么

在酸性條件下，考馬斯亮蘭G-250染料與蛋白質(zhì)疏水區(qū)結(jié)合，導(dǎo)致da吸收峰由465 nm 變?yōu)?95 nm，同時顏色也由棕色變?yōu)樗{(lán)色，該藍(lán)色化合物顏色的深淺與蛋白質(zhì)濃度的高低成正比關(guān)系。將蛋白質(zhì)樣品或稀釋的BSA 與Bradford試劑混合，測量在595 nm處的吸收值，在建立由一系列稀釋的BSA建立的標(biāo)準(zhǔn)曲線的情況下，蛋白質(zhì)的濃度可以根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線而確定。

考馬斯亮藍(lán)G-250（Coomassie brilliant blue G-250）測定蛋白質(zhì)含量屬于染料結(jié)合法的一種。在游離狀態(tài)下呈紅色，da光吸收在488nm；當(dāng)它與蛋白質(zhì)結(jié)合后變?yōu)榍嗌鞍踪|(zhì)-色素結(jié)合物在595nm波長下有da光吸收。其光吸收值與蛋白質(zhì)含量成正比，因此可用于蛋白質(zhì)的定量測定。蛋白質(zhì)與考馬斯亮藍(lán)G-250結(jié)合在2min左右的時間內(nèi)達(dá)到平衡，完成反應(yīng)十分迅速；其結(jié)合物在室溫下1h內(nèi)保持穩(wěn)定。

該法是1976年Bradford建立，試劑配制簡單，操作簡便快捷，反應(yīng)非常靈敏，亮藍(lán)生產(chǎn)廠家，靈敏度比Lowry法還高4倍，可測定微克級蛋白質(zhì)含量，測定蛋白質(zhì)濃度范圍為0～1 000μg/mL，亮藍(lán)價格，xaio可測2.5μg/mL蛋白質(zhì)，是一種常用的微量蛋白質(zhì)快速測定方法。

考馬斯亮藍(lán)有G250和R250兩種。其中考馬斯亮藍(lán)G250由于與蛋白質(zhì)的結(jié)合反應(yīng)十分迅速，常用來作為蛋白質(zhì)含量的測定。考馬斯亮藍(lán)R250與蛋白質(zhì)反應(yīng)雖然比較緩慢，但是可以被洗脫下去，所以可以用來對電泳條帶染色。

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?本考馬斯亮藍(lán)染色試劑盒(Commassie?Blue?Staining?Kit)采用了經(jīng)典的考馬斯亮藍(lán)染色和脫色方法，以考馬斯亮藍(lán)R250為染料，可用于SDS-PAGE或非變性PAGE等蛋白電泳凝膠的常規(guī)染色和脫色，或Western轉(zhuǎn)膜后PAGE膠上殘余蛋白的檢測。?

???使用本試劑盒，采用常規(guī)染色脫色方法累計時間達(dá)到2-3小時后可以觀察到蛋白條帶；采用快速染色脫色方法20分鐘左右即可觀察到蛋白條帶。觀察到清晰的蛋白條帶則需染色脫色更長時間。?

???本試劑盒中的染色液和脫色液經(jīng)過改良，不含有毒的jia醇，但含有刺激性氣味的yi酸。