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雜交 (1) 盛有2×SSC的塑料盤(pán)同,將干烤的濾膜飄浮在液面上,浸濕5分鐘。(2) 將濾膜轉(zhuǎn)到200ml預(yù)洗液的玻璃皿中。濾膜何疊在一起,放于溶液中。用保鮮膜蓋住玻璃皿,放到位于培養(yǎng)箱內(nèi)的旋轉(zhuǎn)平臺(tái)上。于50℃處理30分鐘。在這一步及以后的所有步驟中,應(yīng)緩緩搖動(dòng)濾膜,防止它們粘在一起。(3) 用泡過(guò)預(yù)洗液的吸水棉紙輕輕地從膜表面拭去細(xì)菌碎片,以降低雜交背景而不影響陽(yáng)性雜交信號(hào)的強(qiáng)度和清晰度。(4) 將濾膜轉(zhuǎn)到盛有150ml預(yù)雜交液的玻璃中,在適宜溫度(即在水溶液中雜交時(shí)用68℃,而在50%甲酰胺中雜交時(shí)用42℃)下,預(yù)雜交1-2小時(shí)。

原位雜交技術(shù)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果

原位雜交技術(shù)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果包括陽(yáng)性信號(hào)和陰性信號(hào)的判斷標(biāo)準(zhǔn)。陽(yáng)性信號(hào)是指探針與目標(biāo)核酸序列特異性結(jié)合形成的雙鏈復(fù)合物,在顯色反應(yīng)、熒光染色或性同位素標(biāo)記下呈現(xiàn)出明顯的信號(hào)。陰性信號(hào)是指探針未與目標(biāo)核酸序列結(jié)合,不呈現(xiàn)任何信號(hào)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果的分析需要結(jié)合探針的特異性和敏感性、組織或細(xì)胞的原始結(jié)構(gòu)以及實(shí)驗(yàn)條件等因素綜合進(jìn)行。

熒光原位雜交(FISH)技術(shù)具有以下優(yōu)點(diǎn):

可多重染色:利用不同的熒光染料標(biāo)記不同的探針,可以實(shí)現(xiàn)多重?zé)晒庠浑s交,動(dòng)物組織原位雜交,從而同時(shí)檢測(cè)多個(gè)序列,提高實(shí)驗(yàn)效率了。

高度創(chuàng)新性和性:FISH技術(shù)不僅可以用于研究已知基因或序列的染色體定位,還可以用于未基因或遺傳標(biāo)記及染色體畸變的研究,在基因定性、定量、整合、表達(dá)等方面的研究中頗具優(yōu)勢(shì)。

動(dòng)物組織原位雜交-武漢貝科新肽科技公司由武漢貝科新肽科技有限公司提供。“原位雜交,亞細(xì)胞定位,蛋白互作,啟動(dòng)子篩選”選擇武漢貝科新肽科技有限公司,公司位于:湖北省武漢市洪山區(qū)關(guān)山大道289號(hào)紫菘逸景華庭二期109棟2層2002-3號(hào),多年來(lái),貝科新肽堅(jiān)持為客戶提供好的服務(wù),聯(lián)系人:夏先生。歡迎廣大新老客戶來(lái)電,來(lái)函,親臨指導(dǎo),洽談業(yè)務(wù)。貝科新肽期待成為您的長(zhǎng)期合作伙伴!

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