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武漢科銳諾生物科技有限公司
主營：外泌體,透射電鏡,掃描電鏡,石蠟切片等技術服務
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原位雜交（in situ hybridization）將標記的核酸探針與細胞或組織中的核酸進行雜交，稱為原位雜交，使用DNA或者RNA探針來檢測與其互補的另一條鏈在細菌或其他真核細胞中的位置。
原位雜交技術的基本原理是利用核酸分子單鏈之間有互補的堿基序列，將有放1射性或非放1射性的外源核酸(即探針)與組織、細胞或染色體上待測DNA或RNA互補配對，結合成專一的核酸雜交分子，經一定的檢測手段將待測核酸在組織、細胞或染色體上的位置顯示出來。為顯示特定的核酸序列必須具備3個重要條件：組織、細胞或染色體的固定、具有能與特定片段互補的核苷酸序列(即探針)、有與探針結合的標記物
癌組織原位雜交實驗步驟：
1. 將準備做原位雜交的樣本常規脫水、浸蠟、包埋。切片厚度6-8μm。
2. 玻片的處理：一般采用多聚賴氨酸或APES。
3. 石蠟切片經常規脫蠟至水。30%H2O2 1份+蒸餾水10份混合，室溫5-10分鐘以滅活內源性酶。蒸餾水洗3次。
4. 暴露mRNA核酸片段：切片上滴加3%檸檬酸新鮮稀釋的胃蛋白酶（1ml 3% 檸檬酸加2滴濃縮型胃蛋白酶，混勻），37℃或室溫消化3--30分鐘（視標本新舊、厚薄自行調整）。原位雜交用PBS洗3次×5分鐘。蒸餾水洗1次。
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第4年
